光學(xué)顯微鏡作為科學(xué)研究的重要工具,在觀察微生物形態(tài)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。以下是使用光學(xué)顯微鏡觀察微生物形態(tài)的具體步驟和注意事項(xiàng):
一、樣品制備
取樣:從待觀察的微生物環(huán)境中取得樣品,如土壤、水體、食品等。
處理:根據(jù)微生物的種類和特性,選擇適當(dāng)?shù)奶幚矸椒?,如稀釋、過濾、離心等,以獲取適合觀察的微生物懸液。
染色:由于微生物細(xì)胞小而透明,直接觀察難以看清其形態(tài)和結(jié)構(gòu),因此通常需要進(jìn)行染色以提高反差。常用的染色方法有革蘭氏染色法、吉姆薩染色法等,根據(jù)微生物的種類選擇合適的染色方法。
二、顯微鏡操作
取鏡安放:右手握住鏡臂,左手托住鏡座,將顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)距邊緣7厘米左右處,略偏左,安裝好目鏡和物鏡。
對(duì)光:轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔,物鏡前端與載物臺(tái)保持一定距離(如2厘米)。將光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔,左眼注視目鏡內(nèi),右眼睜開,轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi),直到看到白亮的圓形視野。
放置玻片:將制備好的微生物玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,確保標(biāo)本正對(duì)通光孔的中心。
觀察:
低倍鏡觀察:操作粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止。然后通過旋轉(zhuǎn)粗準(zhǔn)焦螺旋和細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使物像清晰。
高倍鏡觀察:如需進(jìn)一步放大觀察,將需要放大的觀察物像移至視野中央,轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器換成高倍物鏡,再調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋使物像清晰。注意高倍鏡與裝片距離非常近,只能調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,避免損壞裝片和物鏡。
三、觀察與記錄
觀察微生物形態(tài):在顯微鏡下仔細(xì)觀察微生物的個(gè)體形態(tài),如細(xì)菌的基本形態(tài)(球菌、桿菌、螺旋菌)、特殊構(gòu)造(莢膜、鞭毛、芽孢)等。
記錄觀察結(jié)果:對(duì)觀察的結(jié)果進(jìn)行記錄,可以包括微生物的形態(tài)描述、數(shù)量統(tǒng)計(jì)、分布情況等。
四、注意事項(xiàng)
保持顯微鏡清潔:在使用過程中,要保持顯微鏡的清潔和干燥,避免灰塵和水分對(duì)顯微鏡的損害。
正確操作顯微鏡:遵循顯微鏡的使用步驟和注意事項(xiàng),避免不當(dāng)操作導(dǎo)致顯微鏡損壞或觀察效果不佳。
選擇合適的染色方法:根據(jù)微生物的種類和特性選擇合適的染色方法,以提高觀察效果。
避免污染:在樣品制備和觀察過程中,要注意避免污染和交叉感染。
綜上所述,使用光學(xué)顯微鏡觀察微生物形態(tài)需要經(jīng)過樣品制備、顯微鏡操作、觀察與記錄以及注意事項(xiàng)等多個(gè)步驟。通過正確的操作方法和注意事項(xiàng),可以清晰地觀察到微生物的形態(tài)和結(jié)構(gòu)特征。